335. stíhací-přepadová peruť vznikla za druhé světové války 14. května 1941 v Kirton-in-Lindsey v Anglii jako 121. peruť Royal Air Force. Byla druhou ze tří Eagle Squadrons, jejichž personál tvořili američtí dobrovolníci sloužící ještě před vstupem USA do války.

Zpočátku používala Hurricane Mk I a před dosažením operační způsobilosti 21. července 1941 přešla na Mk IIB. V říjnu zahájila obranné hlídky a v listopadu přešla na Spitfire Mk VB. Dne 15. listopadu zaznamenala první zničený nepřátelský letoun. V únoru 1942 začala létat stíhací přepady nad severní Francií a 19. srpna se účastnila operace Jubilee, nájezdu na Dieppe.

Dne 22. srpna 1942 byla ustavena 335. stíhací peruť, 12. září aktivována v Bushey Hall a 29. září do ní byla převedena 121. peruť RAF. Jednotka se stala součástí americké 4. stíhací skupiny a přesunula se do Debdenu. Zpočátku nadále používala Spitfiry a svou první misi s 4. FG provedla 2. října 1942.

Začátkem roku 1943 přešla na P-47. Poslední mise se Spitfiry provedla 16. března a 8. dubna se společně s dalšími dvěma perutěmi skupiny zúčastnila stíhacího přepadu na Saint-Omer, prvního nasazení všech tří perutí 4. FG na P-47.

Koncem února 1944 přešla na P-51. Dne 4. března se všechny tři perutě 4. FG staly první americkou bojovou jednotkou, která doprovázela bombardéry nad Berlín. Za agresivní ničení nepřátelských letounů a útoky na německá letiště od 5. března do 24. dubna získala 335. peruť první Distinguished Unit Citation.

Dne 6. června 1944, v první den operace Overlord, ztratila při poslední misi dne čtyřčlenný roj napadený čtyřnásobnou německou přesilou; všichni čtyři piloti zahynuli. Následující týdny létala nad Normandií úkoly přerušování dopravy a boje proti nepřátelskému letectvu.

Od 21. června se účastnila operace FRANTIC II, kyvadlových misí, při nichž B-17 a jejich doprovod po útoku přistávaly na letištích v Sovětském svazu. V září podporovala operaci Market Garden, v zimě bojovala během bitvy v Ardenách a 24. března 1945 kryla operaci Varsity.

Do konce války zničila 262 nepřátelských letounů, 165 ve vzduchu a 97 na zemi. Po skončení války v Evropě pokračovala ve výcviku pro plánované nasazení v Pacifiku, ale po návratu do USA byla 10. listopadu 1945 deaktivována.

Dne 9. září 1946 byla znovu aktivována na Selfridge Field a vybavena P-80, později F-80. Po přesunu na Langley AFB v roce 1949 přešla na F-86. Dne 20. ledna 1950 byla přeznačena na 335. stíhací-přepadovou peruť 4. stíhací-přepadové skupiny.

Když začala korejská válka, sídlila na Andrews AFB v Marylandu. Dne 11. listopadu 1950 dostala spolu se zbytkem 4. FIW rozkaz k okamžitému nasazení v Koreji. F-86 byly přepraveny na USS Cape Esperance do Japonska a po opravách poškození způsobeného mořskou solí přelétnuty na Johnson AFB.

Dne 13. prosince vedl velitel 4. FIW John C. Meyer oddíl F-86, označený Detachment A, z Johnson AB na Kimpo; skupina zahrnovala i piloty 335. perutě. Dne 2. ledna 1951 byl kvůli čínskému postupu celý 4. FIW evakuován zpět do Japonska.

335. peruť pokračovala v bojových misích a 14. ledna byla přesunuta do Taegu. Létala ozbrojený průzkum, přímou podporu řízenou předsunutými leteckými návodčími v AT-6 a bojové hlídky. Na konci ledna se kvůli nevhodnému povrchu dráhy v zimních podmínkách vrátila na Johnson AB.

Dne 1. května 1951 vystřídala 334. peruť v Suwonu. V srpnu se přesunula na Kimpo, v září zpět na Johnson AB a začátkem listopadu znovu na Kimpo, které zůstalo její základnou do konce války.

Po zbytek války doprovázela B-29, prováděla stíhací přepady, narušovala komunikační trasy, létala ozbrojený průzkum a bojové hlídky, zajišťovala protivzdušnou obranu a podporovala pozemní síly.

Poslední den války, 27. července 1953, sestřelil kapitán Ralph Parr ve 12:30 transportní Il-12 a dosáhl posledního potvrzeného vzdušného vítězství konfliktu. Bylo to jeho desáté vítězství, všechna získal během pouhých 30 misí v posledních sedmi týdnech války.

Do konce korejské války bylo 335. peruti připsáno 218,5 zničených MiGů-15, díky čemuž získala titul „World's Leading MiG Killers“. V kombinaci s výsledky z druhé světové války se stala nejúspěšnější perutí amerického letectva v obou konfliktech.

Za korejskou válku získala dvě DUC za období 22. dubna až 8. července 1951 a 9. července až 27. listopadu 1951 a dvakrát Presidential Unit Citation Korejské republiky.

Po válce zůstala na Kimpu do listopadu 1954, poté byla přesunuta do Chitose v Japonsku. Na Dálném východě zůstala do prosince 1957, kdy se přesunula na Seymour Johnson AFB v Severní Karolíně.